Atrapados en una prisión en la que cada habitación tiene cuatro puertas pero aparentemente ninguna salida, los jugadores deben intentar encontrar a Room 25, la supuesta salida a esta pesadilla. Pero algunos de ellos podrían ser guardianes de la prisión, esperando el momento adecuado para atacar. En el juego cooperativo Room 25, no todos quieren escapar de la prisión, pero ¿quién es el traidor? Cada turno, los movimientos de los jugadores están preprogramados, lo que requiere discusión, negociación - y posiblemente traición.
Room 25 incluye cinco modos de juego diferentes, desde la cooperación total hasta el juego en solitario.